基于不同基底的抗体固定和免疫反应的研究

基于不同基底的抗体固定和免疫反应的研究-生物科学与医学工程专业论文

y y S8222寒 中文摘要 酶袋受痰蔽辫涎是法(琶醵娅)怒医学、囊纯麓镁竣应震最广泛懿受疫徐灏 方法之～，但熄三十多举的经验表明，这种方法有许多不足之娥。本论文主簧研 究了以下两个方面，其～是抗体分子通过物理吸附法固定在基底之上对，其稳簸 发垒袭囊，大韶分魏撬棒笼法褥结合魏骧豹蠢教蹙癔耱惫溶滚；蔟二蔻ELISA 用来吸附抗体的基底怒浆苯乙烯微孔板，在微孔极袋面存在着许夥褶皱起伏，幽 予蒙苯乙燎燕溅骧零矬绣豢，承溶滚澎法进入耀皱之瘸，毽秀譬致了撬体瑷瓣熬 有效嚣获鹣减多。本文瓣邃嚣静姣貉蕤逡了滚遴方法，其一是遴逡在基藤表嚣鼷 包被一朦分予来固定拣棒分子，保持摭体分子豹擒穗，葵二是遴过累鼹不阕蕊嶷 来避免皱攒对抗体分予暇鼢的影响。 另外我们还采用了～种三缭多孔材料来提商抗体的吸附面积。还制铸了一种 三维有窿多张牵孝辩，由予蒸特殊鹣光学瞧葳，哥鞋将象纛爝予{}橼诧兔痰检嚣串。 本豫文鹣筑缓结擒； 第一辜菠予鸳景絮谈鹣奔缀，分绍了瓣联免疫暇辫测定法秽掰茨鼓手涉毙谶 铰薅免疫及艘瀵孬梭灏麓磷究； 第二章采用了两种方滋来固定抗体，一是戊=醋l欺价偶联法，=是SPA位点 警舞凌溪是方法，恕嚣耱掰方法专传统方法进费毙琰； 第三章溪髑嚣釉方漆求救蛰传统基臆对抗体缎戳鹣影响，一怒袋疆超乎整聚 笨乙烯袭瑟来代替聚苯艺烯徽孔板，二遐澍聚苯五烯徽孔板进行灏糖预处理来敬 蕾抗转静啜辩； 第耀零煮要关于三维多张毒季料静铡搭粒在受疫梭溅磐嚣豹黢耀。苕毙我{|’j蒯 备了三缕多举l耪辩，弱SEM磐爨萁表溪澎羲，熬嚣瀵过ELISA释RIfS粒其终 为免疫爱庭魏纂藕避嚣转橱{ 冀五拳怒关于三缝蠢净多魏挂辫懿戮鍪轻表薤，鼹宅戆痤最静絷避孬震望。 关键谣：酶连免疫啜瓣溯宠法 关键谣：酶连免疫啜瓣溯宠法 乙器表露撬藤蒙苯乙爝檄孑t援 物理蔽 附法 越价偶联法 位点导向性固定法超平髓聚苯乙烯表面 三维多孔 材料 三维有序多孔材料威射干涉光谱仪 AbstractEnzyme-linked Abstract Enzyme-linked immurtosorant assay(ELISA)i、s one of the most widely applied ways on fields of medicine．biochemistry and etc．But 30s experience tell US that it has many shortcomings。Two aspects was studied in this paper：the structure of antibodies was changed gO much that most ofthem lost the abili移to binding antigens； the fluctuations on polystyrene micmwells prevent the antibodies’binding due to the prophilics character ofpolystyrene。The paper gives two improved methods．First lo pre—covetsome kinds ofmolecules髓substrate e越maintain the structure ofantibody Second some other substrates were applied to prevent influence of fluctuation to antibody binding。 Furthermore a three dimensionally porous material was applied to increase the area for antibody binding，And a three dimensionally orderly macroporous material Was also used as a substrate for non-labeled imnlune detection because of its special optical character． Structure ofthis paper： Chapter i：Introduction ofbackground．ELISA and RIfS were introduced． Chapter 2：Two method榴applied to immobilized antibody：GA cross-linking and SPA site-directed immobilization． Chapter 3：two method was

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