PCR如何扩增大片段质粒??

发布时间:2024-12-21 03:37

相关问答

PCR如何扩增大片段质粒?

1个回答2023-04-17 10:52

设计一对引物,针对基因两端(覆盖酶切位点),在上游引物中酶切位点后的一段序列中添加一个碱基,扩增以后,酶切产物和空载体,再连接一遍,转化,小提拿去测序。 最好上游换另一个内切酶位点,这样方便双酶切检测

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PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接

1个回答2022-09-14 07:27

已经得到扩增的目的基因片段和克隆载体→对两者分别进行酶切(选要相同的限制性内切酶对两者进行切割)→酶切产物经琼脂糖凝胶电泳回收→克隆载体和目的基因进行连接(一般选用T4连接酶)→大肠杆菌感受态细胞的制

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酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么

2个回答2022-09-04 00:38

什么酶呢?最后酶切组的电泳条带是弥散,是只有质粒条带没有酶切产物条带,还是干脆就是空白? 如果是弥散,最有可能的是所用的酶的反应条件要求比较严格,因为掌握不当而产生了星号活性,导致把质粒切碎了。建议

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菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么?

1个回答2023-01-12 11:57

同样的问题,我也正经历着,别着急慢慢分析原因。 如果你做得是质粒的构建,我想根本的原因是没有连接上,那得重新做,考虑连接的问题。 对于你的那个5天得菌液,原则上说菌液放久了,质粒可能会丢失,你可以重新

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