外源性硫化氢通过下调TGF β

【摘要】： 目的:探讨外源性硫化氢是否可以通过TGFβ-PI3K/AKT-HIF-1α信号通路抑制NIH3T3细胞增殖及作用机制。方法:将体外培养的小鼠胚胎肺成纤维细胞(NIH3T3细胞)随机分成5组,A组(空白对照组),B组(TGF-β1组),C组(TGF-β1+NaHS组),D组(TGF-β1+MK-2206组),E组(TGF-β1+NaHS+MK-2206组)。A组不加入TGF-β1,在普通细胞培养箱(37℃,5%CO_2及95%空气)孵育24h;B组加入TGF-β1(5μg/L)培养24h;C组加入NaHS(40μmol/L)预处理1h后,再加入TGF-β1(5μg/L)培养24h;D组加入MK-2206(50nmol/L)作用1h后再加入TGF-β1(5μg/L)培养24h;E组加入MK-2206(50nmol/L)作用1h,再加入NaHS(40μmol/L)作用1h后,最后加入TGF-β1(5μg/L)培养24h。分别于12、24、48小时观察五组的细胞形态学变化、增殖,并检测α-SMA、Collagen I、AKT、ρ-AKT、HIF-1α五种蛋白的表达情况。结果:1、倒置相差显微镜观察结果:A组为成纤维细胞,表现为多突起的纺锤形或星形结构;而其它各组则见有较多的扁平状纤维结构的肌成纤维细胞,B组尤其明显。2、MTT结果:B、C、D、E四组在12、24、48小时的细胞存活率由高到低依次是B>D>C>E>A(P<0.05),且24小时细胞存活率在三个时间点为最高。3、WB结果:α-SMA、Collagen I的蛋白表达水平由高到低依次为B>D>C>E>A(P<0.05)。AKT、ρ-AKT、HIF-1α的蛋白表达水平由高到低依次为B>C>D>E>A(P<0.05)。结论:外源性硫化氢通过下调TGFβ-PI3K/AKT-HIF-1α信号通路抑制ρ-AKT、HIF-1α的表达,抑制NIH3T3细胞增殖。

【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2020

网址：外源性硫化氢通过下调TGF β http://c.mxgxt.com/news/view/722928

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